质粒提取实验常见问题分析

质粒提取常见问题分析

1、影响质粒提取的因素有哪些？

质粒提取的得率和质量与很多因素有关，如宿主菌的种类和培养条件、细菌细胞的裂解、质粒拷贝数、质粒的稳定性、抗生素、吸附膜的吸附能力、提取操作的熟练程度等等。

2、为什么从革兰氏阳性菌中提取质粒要在悬浮液中加入溶菌酶？

革兰氏阳性菌有一层细胞壁，必须加入溶菌酶才能使之溶解。

3、如何根据实验需要选择不同级别的产品？

从纯度上：各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、文库筛选、连接和转化，普通纯度的质粒可以满足要求；而对于转染实验，则要求使用高纯度质粒提取试剂盒方能满足要求。

从提取的量上：1-20μg，应选择小量提取试剂盒；20-40μg，应选择中量提取试剂盒；大于40μg，应选择大量提取试剂盒。

从宿主菌上：分为普通细菌质粒提取试剂盒、G+菌质粒提取试剂盒和酵母菌质粒提取试剂盒，根据情况进行选择。