细菌的纯种分离和接种技术注意事项
2024-07-10 9:21 来源:上海远慕生物试剂
培养基与菌种分离
培养基与菌种分离是从含有多种微生物的样品中获得纯种微生物的操作技术。菌种分离主要在培养皿上进行,常用的方法是稀释法和划线法。使用这两种方法的目的是是微生物的一个个体通过繁殖,在固体培养基上长出肉眼能见的群体,根据培养特征,用接种针调取所需菌种并在显微镜下检查,证明为单一形状的菌体。常用的培养基是选择培养基。
如分离分解纤维素的微生物用的培养基是以纤维素为碳源的培养基,因为从这种培养基上长出来的只能是分解纤维素的微生物。
细菌的纯种分离和接种技术中,需要注意的事项有:稀释度的问题纯种分离的时候,无非是把菌液稀释一定梯度后,涂布在诸如LB培养基上。
如果没有稀释好,就会导致细菌长得太密,或者是细菌根本不长。最优的稀释梯度是最后在平板上的菌落数在30至300之间。此时,能清楚地看清菌落的形态,便于挑取单菌落。
基本形态与大小有以下几种类型:
①单球菌:单独存在,如尿素小球菌;
②双球菌:如肺炎双球菌;
③链球菌:如乳酸链球菌;
④四联球菌:形成的4个细胞排列在一起,成田字,如四联球菌;
⑤八叠球菌:如尿素生孢八叠球菌;
⑥葡萄球菌:如金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)。
长宽相差较大的棒杆状或长杆状菌,如枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、梭状杆菌(Bacterium fusiformis);分枝状或叉状菌,如双歧杆菌属(Bifidobacterium);竹节状(两端平截),如炭疽芽孢杆菌(Bacillusanthracis)等。