动物细胞培养的技术应用与培养步骤

动物细胞培养的技术应用

1、生物制品的生产(如制备单克隆抗体）

2、转基因动物的培养

3、检测有毒物质并判断其强弱

4、医学研究（生理 病理 药理）

5、器官移植培养

6、筛选抗癌药物

动物细胞培养的培养条件

1、无菌、无毒的环境：对培养液和所有培养用具进行无菌处理，通常还要在培养液中加入一定量的的抗生素，以防被污染。此外应定期更换培养液，以便清除代谢产物防止细胞代谢产物累积对细胞自身产生危害。

2、营养物质：无机物（无机盐、微量元素等），有机物（糖、氨基酸、促生长因子等）

3、血清和血浆 (提供细胞生长必须的营养成份)

4、温度和pH（36.5±0.5℃，7.2～7.4）

5、气体环境（95%的空气+5%CO₂的混合气体）

6、其中5%CO₂气体是为保持培养液的pH稳定

动物细胞培养的培养步骤

注：所有步骤应在无菌无毒的超净工作台进行。胰蛋白酶处理时间不宜过长。

取离体的动物组织，器官或细胞，剪碎并加入胰蛋白酶分解成单个细胞，配置形成细胞悬液。

制备动物细胞培养液体培养基（需加入血清，保证无菌无毒），将细胞接种至培养基，放入二氧化碳培养箱中进行初代培养。

当细胞增殖达到一定程度，出现接触抑制现象时，用胰蛋白酶再次处理，并用细胞悬液吹打贴壁生长的细胞。进行细胞计数。

依照计数结果，分瓶培养，进行传代培养。获得细胞系或细胞株。