提取质粒DNA的质量和含量的鉴定方法

琼脂糖凝胶电泳鉴定质粒DNA

琼脂糖凝胶电泳是分离鉴定和纯化DNA片段的常用方法。DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应，DNA分子在高于等电点的pH溶液中带负电荷，在电场中向正极移动。

由于糖磷酸骨架在结构上的重复性质，相同数量的双链DNA几乎具有等量的净电荷，因此它们能以同样的速度向正极方向移动。
不同浓度琼脂糖凝胶可以分离从200bp至50kb的DNA片段。在琼脂糖溶液中加入低浓度的溴化乙锭(ethidum bromide ,EB)，在紫外光下可以检出 10ng的DNA条带，在电场中，pH8.0条件下，凝胶中带负电荷的DNA向阳极迁移。

质粒DNA提取方法
1，碱裂解法
2，煮沸裂解
3，羟基磷灰石柱层析法
4，质粒DNA释放法
5，酸酚法等。

选择哪一种方法取决于以下几个因素
1，质粒的大小
2，大肠杆菌菌株
3，裂解后用于纯化的技术和实验要求