【血液细胞染色】瑞氏染色法注意事项

瑞氏染色法的染色原理

物理吸附与化学亲和作用

嗜酸性物质→伊红+ Hb、嗜酸性颗粒

嗜碱性物质→亚甲蓝+ 细胞核蛋白、L及B胞质


瑞氏染色法的注意事项

①选用的玻片应洁净干爽、无污物潮湿 ，否则 ，有可能出现血片不洁、血细胞被玻片上的杂物损坏、以及 “潮湿”使血细胞着色产生偏差等不 良后果。

②血膜厚薄要适宜 ，太厚或太薄均不好 ，太厚不仅容易造成血细胞过多过密 、血膜片浓染 。而日常会使部分 血细胞浓缩变小 、形态不佳 。太薄 ，血片的血细胞偏少 ，用于教学不理想 。每张血片的采血量约半粒黄豆大小为宜。推血片时，推片与血膜片约呈 45。夹角 ，这样制成的血膜的厚薄较为合适。

③刚推好的、血液未干的血膜片要水平放置晾干。若此时直立放置 ，血液就会向下流动，很多血细胞就会跑到血液流向方血膜片一侧的边上 ，以至血膜片中央大部分 的血细胞数量相对减少。

④染色前 ，用甲醇将血膜片固定 ，能更好地保存血细胞的完好和完整，避免其变形、收缩和破碎 。

⑤注意制作方法中的三处 “晾干”，否则 ，可能会产生血细胞着色不良、染色效果不好以及血片质量不佳等结果。


简易步骤：

1、 取病料涂片、自然干燥

2、 滴加瑞氏染液染3分钟,使标本被其中甲醛所固定;

3、 加等量PH6.4的磷酸盐缓冲液(或等量超纯水)轻轻晃动玻片,均匀静置5分钟;

4、 水洗、吸干、镜检。

5、 细菌染成蓝色，组织细胞胞浆红色，细胞核蓝色或紫色。