PCR非特异性扩增的原因及处理办法

原因：

1、引物特异性差

2、模板或引物浓度过高

3、酶量过多

4、Mg2+浓度偏高

5、退火温度偏低

6、循环次数过多

对策：

1、重新设计引物或者使用巢式PCR

2、适当降低模板或引物浓度

3、适当减少酶量

4、降低镁离子浓度

5、适当提高退火温度或使用二阶段温度法

6、减少循环次数