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1、组成成分:
A、1×TE缓冲液:10mmol/LTris.Cl;1mmol/LEDTA,pH8.0。
B、1×TAE缓冲液:40mmol/LTris-乙酸;2mmol/LEDTA,pH8.0。
C、1×TBE缓冲液:45mmol/LTris-硼酸;1mmol/LEDTA,pH8.0。
2、用途:
A、TE缓冲液:一般用作溶解剂或保持剂,常用于溶解DNA,能稳定储存DNA。
B、TAE缓冲液:生物学中使用最广泛的核酸电泳缓冲液,主要用于DNA的琼脂糖凝胶电泳。
C、TBE缓冲液:生物学中常用的核酸电泳缓冲液,主要用于DNA的琼脂糖凝胶电泳。
3、TAE和TBE缓冲液的选择:
TAE和TBE缓冲液都可以用于DNA的琼脂糖凝胶电泳,两者各有利弊,应根据实际情况选择不同的缓冲液。
TAE和TBE缓冲液的比较
TAE缓冲液:
成分:40mmol/LTris-乙酸;2mmol/LEDTA
优点:超螺旋在其中电泳时更符合实际相对分子缓冲容量小,长时间电泳(如过夜)不可选用。质量电泳大于13kb的片段时分离效果好,可用于回收DNA片段。
缺点:缓冲容量小,长时间电泳(如过夜)不可选用。
TBE缓冲液:
成分:45mmol/LTris-硼酸;1mmol/LEDTA
优点:缓冲能力强,适合较长时间电泳,分辨率较高,电泳小于1kb的片段时分离效果好。
缺点:缓冲液中的硼酸成分会影响DNA回收效率以及后续的酶反应实验。
4、注意:
TBE浓溶液长时间存放后会形成沉淀物,出现沉淀后应予以废弃。