蓝色琼脂糖凝胶6FF实验操作步骤
2017-11-28 17:05 来源:上海远慕生物试剂
蓝色琼脂糖凝胶6FF简介:
蓝色琼脂糖凝胶6FF是将蓝色染料偶联到高度偶联的琼脂糖凝胶上,具有很化学性质稳定,机械强度高,流速快的特点;主要是通过配基提供电子对作用与疏水作用的综合作用与目标蛋白结合,一种应用很广泛的亲和色谱材料,适用于白蛋白、干扰素、α-2巨球蛋白、凝血因子以及各种需要NAD+和NADP+的酶的工业化纯化使用。
上海远慕生物详细介绍蓝色琼脂糖凝胶6FF实验操作步骤,适用范围,用途等说明!
中文名:蓝色琼脂糖凝胶6FF
英文名:Blue Sepharose 6FF
供应商:上海远慕
规格:25ml,100ml
基质:6% 交联琼脂糖凝胶
配基:蓝色染料
配基密度:10μmol/mL
颗粒大小:45-165μm
最大流速:300cm/h
工作PH:3-10
清洗PH:2-13
操作温度:室温
保存条件:保存于20%的乙醇于+4-8°C
存储条件:常温,阴凉
用途:生化研究。纯化各种需要NAD、NADP作为辅酶的的酶类、白蛋白、凝血因子、干扰素等。
保存温度:2~8℃
性状:蓝色液体,底部为胶体
蓝色琼脂糖凝胶6FF适用范围:
蓝色琼脂糖凝胶适用可适用于白蛋白、干扰素、α2巨球蛋白、凝血因子及各种需要NAD和NADP的酶的分离纯化。
蓝色琼脂糖凝胶6FF实验操作步骤:
1.蓝色琼脂糖凝胶6FF装柱,1.6×20cm,柱床体积为15ml;
2.用缓冲液1平衡5-10个床体积,流速为4ml/min;
3.含牛血清白蛋白的样品离心,用缓冲液1进行1:1稀释,0.45μm滤膜过滤,上样。流速为2ml/min;
4.用缓冲液1再洗5-10个床体积,流速为2ml/min;
5.用缓冲液2洗脱,流速为2ml/min,收集洗脱峰;
6.用纯水流洗5个柱床体积,再用20%的乙醇流洗5个柱床体积,流速为4ml/min,柱子置于4~8℃环境中保存;
7.将分离纯化的BSA进行SDS-PAGE电泳分析。缓冲液组成: 缓冲液1:50mMKH2 PO4 ,pH7.0。缓冲液2:50mMKH2 PO4 ,1.5MKCl,pH7.0。
蓝色琼脂糖凝胶6FF实验操作步骤注意事项:
1.该凝胶从冷室或冰箱中取出后最好在室温下缓慢振摇恢复到室温,然后再装柱,以免产生气泡影响柱效。
2.第一次使用得先用20%的乙醇洗5个柱床体积,然后再用2MNaCl洗5个柱床体积,洗去残留的染料,再平衡使用。
3.上样样品必须与缓冲液1的pH、电导相同。
4.蓝色琼脂糖凝胶FF亲和填料的再生处理方法:用0.5MNaOH含2MNaCl流洗3个床体积,最后用20%乙醇洗3个床体积即可。
5.该亲和填料保存条件为20%乙醇,4~8℃。
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