考马斯亮蓝快速染色液实验操作时需注意细节
2017-12-07 13:56 来源:上海远慕生物试剂
考马斯亮蓝快速染色液是一种即用型快速灵敏而且安全的
染液,用于SDS-PAGE或者非变性胶的快速染色,在半小时内就可以出结果。
考马斯亮蓝快速染色液灵敏度高达10ng,不仅节省了制备相关溶液所需的时间和精力,完全没有毒性而且不需要酸、醇固定或者脱色,以其方便快捷的操作,卓越的灵敏度,成为蛋白质染色产品中的首选。
适用范围:SDS-PAGE或非变性PAGE蛋白电泳胶的快速染色,或Western转膜后PAGE胶上残余蛋白的检测。
保存条件:2-8℃保存一年。
虽然考马斯亮蓝快速染色液因自身优点成为蛋白质染色产品中的首选,但在实验过程,以下几点细节还需要注意:
1.PAGE电泳后凝胶采用蒸馏水清洗的目的在于去除凝胶中的SDS等干扰物质。如果不能充分去除SDS会导致背景较高。如果凝胶很厚,洗涤时间应适当延长、洗涤次数应适当增加。蒸馏水洗涤去除凝胶中的杂质时,如果使用经过加热或沸腾的蒸馏水,每次洗涤时间可以缩短至 1~2min。
2.染色时如果把凝胶和染色液一起放置在微波炉中适当加热,可以大大加快染色速度。但加热时宜尽量避免沸腾,以免出现因暴沸而导致的凝胶碎裂。
3.如果希望染色的背景更低,希望获得更加清晰的蛋白条带,可以加入适量的室温蒸馏水进行洗涤。通过蒸馏水洗涤可以进一步降低背景。在4℃蒸馏水中浸泡一段时间可以获得背景更低,条带更清晰的条带。在次日对4℃蒸馏水浸泡一段时间的已经进行了染色的凝胶再同前一天一样进行染色和洗涤可以进一步改善染色效果,获得更好的染色蛋白条带。
4.本染色液呈酸性,有轻微腐蚀性,使用时请作必要防护。
5.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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