MC3T3-E1 小鼠胚胎成骨细胞前体细胞说明书

        
 
 
 
 
 
 
五、组成：

 

六、细胞接收后的操作流程与注意事项
1. 您收到细胞时，若干冰已经完全融化，请立即将细胞复苏培养，切勿再次低温冻存；若尚留有干冰，请立即将含有细胞的冻存管放入液氮中保存待用，并按指定条件贮存细胞，切不可将细胞置于高温环境。
2. 请您在接收细胞后的4周内及时做复苏培养，以确认细胞活力、状态并保种。逾期恕不受理售后问题，谢谢合作！
3. BNCC冻存细胞采用优化配比的细胞冻存液，无需离心，细胞解冻后直接将250 ul细胞悬液滴入装有8-10 ml完全培养基的细胞培养瓶/培养皿中培养。

七、贴壁细胞常规培养传代流程（请严格遵守无菌操作）
1. 吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加1~2 ml 含0.25% EDTA的胰酶进行消化（注意把握消化时间，通常控制在1~2min）。
2. 镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小时去掉胰酶，加6~8 ml 完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落、吹散。
3. 取出部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，于培养箱中培养。
4. 注意培养基PH值变化情况，定期换液，待细胞密度达到70-80%以后重复传代操作或者冻存。

八、悬浮细胞常规培养传代流程（请严格遵守无菌操作）
1. 悬浮细胞常规传代操作为半量换液，分瓶传代，即取出一半细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，于培养箱中培养；也可根据细胞密度分多瓶传代。
2. 注意培养基PH值变化情况，定期换液，待细胞密度达到70-80%时重复传代操作或者冻存。

九、半贴壁半悬浮细胞培养注意事项（请严格遵守无菌操作）
1. 若悬浮细胞较多且折光率良好，可离心收集，继续培养。
2. 若有少量细胞悬浮，也可不用收集，传代操作按常规贴壁细胞操作流程处理。
3. 若悬浮细胞较多，离心收集，原瓶中贴壁细胞按照常规规贴壁细胞操作流程进行消化、终止消化、吹打，并与之前收集的悬浮细胞混悬，分瓶培养。