毒扁豆碱对乙酰胆碱作用的影响实验的操作步骤

1.  连接好实验装置，保证实验条件。
 
2.  记录装置的条件：将台式平衡记录仪量程旋纽置于 5 mv,打开记录笔将笔调到记录 的合适位置。取２ g 砝码悬挂在换能器的小钩上，调节载波放大器的“增益”、“调零”旋 钮，使记录笔上升１大格（25 mm），取下砝码后，记录笔又到原位置（加砝码时调“增益” 旋钮，取下砝码时调“调零”旋钮，需要重复数次即可）。记录速度 8 mm/min。
 
3.  标本的制备：将蟾蜍破坏大脑与脊髓，背位固定于蛙板上，剪开腹部皮肤，在耻 骨上端以小镊子分别穿线结扎左右腹直肌的肌腱，于结扎的下方剪断肌建，沿腹白线向 上剪开（应注意避免剪断腹壁内侧的腹壁静脉）以分离左右腹直肌，再沿腹直肌外缘向 上剪开，在第二腱划高度分用线结扎两侧腹直肌，并在结扎线上方剪断肌肉。标本制成 后，以 Ringer 氏液洗净，放入置有 Ringer 氏液的烧杯内，备用。
 
本实验选用蟾蜍腹直肌的理由是因为蟾蜍腹直肌对乙酰胆碱较敏感，药物作用较缓 和、稳定，易于比较收缩的高度。
 
4.  标本的悬挂：将腹直肌标本一端固定在浴管底部，另一端悬挂于力位移换能制的 小钩上。腹直肌的张力变化通过力位移换能器、载波放大器后，记录在台式平衡记录仪 上。悬挂好标本后, 立即换液１次，再给腹直肌标本加前负荷 2 g（上升１大格、25 mm 即 可），稳定 30 分钟，即可加药。
 
5.  给药方法：按累积给药法，先观察各浓度乙酰胆碱收缩蟾蜍腹直肌的量效关系， 给药顺序见表 4-8。然后冲洗，先冲洗４－５次，再每隔 10 分钟换液１次，待腹直肌标 本重新恢复至基线（约 40 分钟）后,加入 10-3 mol/L Physosti gmine（毒扁豆碱）0.1 ml,作用 15 分钟后，仍按累积给药法加入各度的乙酰胆碱，观察毒 扁豆碱对乙酰胆碱量效关系的影响，给药顺序见表 4-9。