酵母菌简介:
酵母菌是基因克隆实验中常用的真核生物细胞,也是食品工艺中常用的微生物,如酿酒酵母。
酵母菌细胞宽度(直径)约2~6μm,长度5~30μm,有的则更长,个体形态有球状、卵圆、椭圆、柱状和香肠状等。由于其尺寸较小,形状不规则,因此采用明场法无法进行准确的计数,更不易进行酵母活性的检测!
采用双荧光通道设计的细胞计数仪,可更加准确地进行细胞计数和细胞活性分析。
接下来我们看一下它是如何进行酵母计数和活性检测的吧?
步骤一:FDA/PI染色
取1?l FDA试剂、1?l PI试剂加入到18?l酵母菌液中,避光孵育10min。
FDA/PI试剂染色原理介绍:FDA是一种非荧光性疏水性荧光素衍生物,它可以穿透细胞膜进入细胞,通过细胞内酯酶催化水解二乙酸酯基团产生具有高荧光强度的荧光素。因此活细胞具有绿色荧光。无活性的死细胞被PI着色,发出红色荧光。因此,可以很好的辨别死细胞与活细胞,准确的进行细胞活性的检测。
步骤二:上样
用移液枪吸取10?l 样品加入到细胞计数板中。
将细胞计数板插入到LUNA FL中。
步骤三:检测
直接点击内置的酵母检测App
在明场下进行调节焦距,然后点击Count即开始细胞检测,30秒内即可完成。
步骤四:结果查看、分析、导出
结果查看:
我们可以得到Total /Live /Dead细胞数量、细胞活性、细胞平均尺寸等数据。
结果分析:
我们可以设置细胞分析的尺寸范围以及聚团情况等。
结果导出:
点击Save/Print即可将结果导出,您可以选择保存3个通道的原始图片、加了Tag的图片、包含了该次检测所有信息的PDF文件。