Goldner三色染色液注意事项
2021-08-03 15:41 来源:上海远慕生物试剂
中文名称:Goldner三色染色液
产品规格:6×50mL|6×100mL
用途:又称戈德纳三色染色液,主要用于骨组织染色。
注意事项:可不脱钙染色,可用MMA塑料包埋,脱塑后直接染色。
储存条件:室温,避光,12个月
产品简介:
骨染色方法有很多种,例如甲苯胺蓝法、阿利新蓝法、番红O 法、Goldner三色染色法等。Goldner 三色染色又称戈德纳三色染色,与 Masson 三色染色类似,三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。
三色染色液染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关:分子的大小由分子量来体现,小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织;而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。该染液多用于骨类物质的染色,对细胞染色效果较好,尤其适用于代谢性疾病(Paget 病、骨性营养不良等)的研究,以评估成骨细胞和破骨细胞的活性,并容易辨认骨髓中的转移性肿瘤细胞。
自备材料:
1、系列乙醇
2、蒸馏水
操作步骤 (仅供参考) :
1、切片二甲苯脱蜡或脱塑料,乙醇漂洗,入水。
2、入配制好的 Weigert 铁苏木素染色 20~30min。
3、流水冲洗 1min,用酸性分化液迅速分化(一般<5s)。
4、流水冲洗 5min,蒸馏水稍洗。
5、入 Acid Ponceau 染色液染色 5min。
6、在上述过程中按蒸馏水:弱酸溶液=4:1 比例配制弱酸工作液,用弱酸工作液洗 15~30s。
7、入 Orange G 染色液染色,直至 Ponceau 染色液,一般需要 3~10min。
8、用配制好的弱酸工作液冲洗 15~30s。
9、直接入亮绿染色液中染色 5min。
10、用配制好的弱酸工作液冲洗 3 次,每次 15s。
11、蒸馏水冲洗,吸干或晾干,无水乙醇快速脱水,中性树胶封固。
染色结果 :
矿化骨 绿色
类骨质 橙色-红色
软骨 紫色
细胞核 蓝色-灰色
注意事项:
1、切片脱蜡应尽量干净。固定起着重要的作用,使用不同的固定液可延或缩短染色时间。
2、取A1、A2等量混合即为Weigert 铁苏木素染液,一般24h失去染色力。
3、酸性分化时间应根据切片厚薄、组织的类别和新旧而定。
4、弱酸溶液可使色彩更清晰鲜艳,如使用量大可自行配制0.1~1%乙酸溶液予以替代。
5、Orange G染色液染色时在镜下控制,以丽春红脱去为准。
有效期:12 个月有效。