中文名称: 基底膜六胺银染色液(PASM)
分类:碳水染色
规格:6×50ml
储存条件:4℃,避光,3个月
用途:基底膜粘多糖染色,又叫PASM染色(periodic acid-silver methenamine)。
注意事项:肾小球囊基底膜、毛细血管球基底膜、网状纤维和Ⅳ型胶原纤维呈黑色,背景呈绿色(用HE复染,核呈蓝色,背景呈红色)。主要由过碘酸、铁明矾、六胺银工作液、氯化金、淡绿等染色液组成。
产品说明:基底膜六胺银(methenaminesilver)染色是一种经典显示基底膜的方法。组织经过氧化,使基底膜内的黏多糖暴露出醛基,醛基把六胺银还原为黑色的金属银。氯化金可使金属银转变为更稳定的金属金,同时使背景更清晰。六胺银染色能清晰地显示基底膜,在肾病变中应用最多,常用来观察肾小球毛细血管基底膜在炎性损伤时如断裂、增生、折叠等形态改变。
操作步骤(仅供参考):
1.切片脱蜡至水洗。
2.切片入氧化剂氧化15min。
3.自来水洗、蒸馏水洗2min。
4.入铁明矾溶液染色10min。
5.自来水洗、蒸馏水洗2min。
6.入配制好的六胺银工作液中,60℃水浴染色大约25~30min,切片呈烟草黄色或黑色为止。
7.入蒸馏水中清洗。
8.用氯化金溶液调色1~2min。
9.蒸馏水洗2min。
10.置于海波溶液1min。
11.自来水洗。
12.用淡绿溶液复染1min。
13.自来水洗。
14.95%乙醇开始脱水,二甲苯透明,中性树胶封封固。
染色结果:
肾小球囊基底膜、肾毛细血管球基底膜 黑色
背景 绿色
注意事项:
1.实验中所用玻璃器皿,应预先放入洗液浸泡过并冲洗干净,烤干。
2.六胺银工作液配制后可放入温箱中预热3-5min(选做)。
3.配制好的六胺银工作液是一次性的,不能久放。
4.氯化金调色时,一定要在显微镜下观察。
5.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。