钙盐染色液(改良茜素红S法)染色步骤

中文名称：钙盐染色液(改良茜素红S法)
分类：金属及盐染色
产品规格：3×50mL|3×50mL
用途：组织学钙盐染色
注意事项：钙沉积物成橙红色,染色时间取决于钙的含量,检测少量钙时更有效。复染液为mayer苏木素。
储存条件：4℃,避光,12个月  

简介：钙在人体内大量存在，构成骨骼作为支持人体的支架，在分泌、运送、肌肉收缩、神经传导等也起重要作用。钙在机体内以两种形式存在，一种是离子钙，存在血液循环内，即所谓血钙；另一种是结合钙，和蛋白、碳酸或磷酸结合而沉着在组织内。除骨骼和牙齿外，正常时钙渗透在所有组织和细胞中，一般不以固体状态出现在组织内。但在某些情况下，钙析出成固体并沉着于组织内，则为病理性钙盐沉着。沉着的钙盐主要是磷酸钙，其次为碳酸钙。钙盐通常是单折射的，但草酸钙是双折射的。当使用HE染色时，钙一般呈紫蓝色。许多染料可以于钙形成螯合物，包括茜素红S、红紫素、核固红等。茜素红S属一种蒽醌类衍生物，是茜素磺酸钠盐，它能与碳酸钙或磷酸钙中的钙盐螯合形成橙红色复合物。一般来说这些染料在识别中至大量的钙时，效果优于轻微染色的微量钙沉积。但茜素红S往往对少量的沉积物可得到更可靠的结果。钙盐染色常用方法有硝酸银法和茜素红S法，本染色液采用改良McGee-Russell法，用茜素红S和Mayer苏木素，钙盐和苏木素结合形成蓝紫色沉淀，尤其适用于少量钙盐组织的染色。

自备材料：
1.10%中性福尔马林固定液
2.自来水
3.显微镜

操作步骤(仅供参考)：
1、组织固定于10%中性福尔马林，常规脱水包埋。
2、切片厚5μm，常规脱蜡至水。
3、切片用茜素红S染色液滴染1-5min(见注意事项1)。
4、稍水洗。
5、McGee-Russell分化液迅速分化数秒。
6、Mayer苏木素染色液浅染胞核1-2min。
7、流水冲洗10min。
8、常规脱水透明，中性树胶封固。

染色结果：
钙沉积物  橙红色
细胞核   蓝色

注意事项：
1、 茜素红S染色时间要根据钙盐的含量来确定。可在显微镜下观察，见钙盐呈较深的橙红色即取出水洗，如染色时间过长，就出现弥散现象，一般1~2min即可。
2、 经过茜素红S染色液染色后，钙沉积物是双折射的。
3、 茜素红S法在辨别和检测少量钙时特别有用。
4、本试剂仅限于实验室科研使用。