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胃蛋白酶抗原修复试剂盒实验步骤

2021-11-30 13:54 来源:上海远慕生物试剂
中文名称:胃蛋白酶抗原修复试剂盒
英文名称: Pepsin Antigen Retrieval Kit
分类:免疫组化
规格:2×100ml
储存条件:—20℃,12个月
用途:抗原修复缓冲液
注意事项:主要由H2O2-甲醇溶液、胃蛋白酶修复液组成。

简介:抗原修复有多种方法,主要方法可简要归纳为加热修复和非加热抗原修复两大类。非加热抗原修复方法包括酶消化、真空负压、酸水解等方法。目前主要是酶消化法,酶消化是以化学的方法来打断醛键,修复抗原。在免疫组织与免疫组织化学中,有时经福尔马林等醛基固定液过度固定的标本,常会产生过量的醛基遮盖抗原,影响一抗与抗原的结合。用蛋白酶溶液消化,可以起到暴露抗原的作用,因而在实验室中胃蛋白酶消化液常被用于组织切片的抗原修复。

操作步骤(仅供参考):
1、切片脱蜡至水。
2、切片入H2O2甲醇溶液处理切片。
3、自来水洗,蒸馏水洗。
4、PBS洗3次,每次1min。
5、滴加或将玻片浸入胃蛋白酶抗原修复液孵育。
6、PBS洗3次,每次2min。
7、按选好的免疫组化染色方法进行染色。

注意事项:
1、由于组织固定方法和时间长短与强度不同,抗原修复所需的消化时间会有很大差异,实验人员应依据免疫染色的结果相应的调整,确定最佳消化时间。
2、胃蛋白酶抗原修复液属蛋白酶制剂,室温放置过久易导致酶活性的降低或丧失,反复冻融亦会导致酶活性的丧失。
3、本品不含防腐剂,一经开启不宜4℃长期保存。
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