大肠菌群显色培养基使用方法

2022-06-14 15:21 来源：上海远慕生物试剂

产品名称：大肠菌群显色培养基
英文名称：Coliform Chromogenic Medium
供应商：远慕生物
产品规格：100g
保质期：三年
用途：用于快速、准确检测大肠菌群，大肠菌群培养24小时，显蓝绿色
应用范围：大肠菌群显色培养基是青岛海博生物公司改良的培养基，用于食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品中大肠菌群的快速检测。大肠菌群显蓝绿色，其它菌显黄色或无色，革兰氏阳性菌被抑制。

配方(g/L)：
特殊营养物质 34.55
显色剂 0.35
琼脂 13.0
pH7.0-7.2 25℃
此配方可以进行改良或增加营养成份以获得最/佳的结果。

用法：
称取本品 47.9g 加入 1000ml 蒸馏水，加热溶解并不停搅拌，煮沸不要超过 1 分钟。分装三角瓶，121℃ 高压灭菌 15 分钟。取 1ml 制备好的样品液加入直径为 9cm 无菌平皿中心，倾入冷却至 45-50℃ 培养基约 15ml，混匀，凝固后，36℃ 倒置培养 18～24h。或冷却至 45-50℃ 时，倾入无菌平皿，琼脂完全凝固后，在 37℃ 的培养箱中倒置放置 1-2 小时，加入适当稀释度的样品液 1ml，涂布于培养基上，36℃ 培养 18～24h。

操作步骤：
1、按国家标准、SN标准、FDA标准或其它方法制备样品液;
2、取样品液 1ml 加入冷却至 45-50℃ 显色培养基中混匀或涂布于平板上;
3、36℃ 培养 18～24 h，选用有 30～200 个菌落的平板，计数平板上出现的典型大肠菌群菌落。大肠菌群典型菌落为蓝绿色，其它细菌为无色或黄色菌落。总大肠菌群=蓝绿色菌落;
4、对可疑大肠菌群菌落可划线接种到营养琼脂平板上，36℃ 培养 12-16 小时，挑取单菌落做大肠菌群 BGLB 发酵试验。

质量控制：
1、外观
此干燥培养基的粉末均匀，具有良好的流动性，呈乳白色。制备好的平板呈透明无色固体培养基。
2、微生物试验
在 36℃ 培养 18～24h 小时：

质控菌株	ATCC	生长情况	菌落颜色
单增李斯特氏菌	19114	-/+	无色
金黄色葡萄球菌	25923	-/+	无色
大肠杆菌	25922	+++	蓝色
沙门氏菌	14028	+++	无色
阴沟肠杆菌	23355	+++	蓝色
产气肠杆菌	35029	+++	蓝色
弗氏柠檬酸盐杆菌	43864	+++	蓝色
肺炎克雷伯氏菌	10031	+++	蓝色

方法的局限性：
本培养基鉴定大肠菌群，少数情况下可能会出现假阳性，但不会出现假阴性，有时可能需做其它补充试验。
典型特征：
大肠菌群典型菌落为蓝绿色，其它细菌为无色或黄色菌落。
贮存：
制备好的平板应立即使用，应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处，保存温度 2-8℃，注意避光保存。
失效：
干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。
注意：
此培养基仅供实验室使用。

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