弧菌显色培养基实验原理

产品名称：弧菌显色培养基
英文名称：Vibrio Chromogenic Medium
供应商：远慕生物
产品规格：100g
保质期：二年
产品用途：用于弧菌的显色培养，副溶血性弧菌显蓝绿色，霍乱弧菌和创伤弧菌显紫红色，溶藻弧菌显淡黄色或米黄色。

简介：弧菌显色培养基用于食品、海产品、病人粪便样品和水产品中副溶血性弧菌的快速检测。副溶血性弧菌显蓝绿色且菌落比较大，霍乱弧菌和创伤弧菌显紫红色，溶藻弧菌显淡黄色或米黄色；其它细菌绝大部分被抑制。本培养基的特异性高，可以克服TCBS培养基引起的假阴性结果，是一种很理想的快速检测培养基。

成份(g/L)
特殊营养物质  75.0
混合显色剂  4.45
琼脂  15.0
pH 8.6±0.1  25℃
此配方可以进行改良或增加营养成份以获得最佳的结果。 

用法
称取本品 18.9g 加入 200ml 蒸馏水，加热溶解并不停搅拌，煮沸3-5次。冷却至 45-50℃ 时，倾入无菌平皿。
注意：制备好的培养基表面不能太干燥。

原理
利用弧菌自身代谢产生的酶与相应显色底物反应使菌落显色，以区分目标菌与非目标菌。显色底物是由产色因子和微生物部分可代谢物质组成，在特异性酶作用下，游离出产色因子使菌落显示一定颜色。

操作步骤
1、按国家标准、SN标准、FDA标准或其它方法制备样品液；
2、取 1ml 样品液加入 9ml SCPB肉汤或碱性蛋白胨水中，36±1℃ 增菌培养 18-24 小时；
3、用 3mm 接种环取 1 环增菌液，划线接种到弧菌显色培养基上，做 2 个平板；
4、36±1℃培养 18-24h，副溶血性弧菌显蓝绿色，菌落比较大；霍乱弧菌和创伤弧菌显紫红色，溶藻弧菌显淡黄色或米黄色，其它细菌绝大部被抑制；
5、对可疑菌落可划线接种到营养琼脂平板上，36±1℃ 培养 12-16 小时，挑取单菌落做副溶血性弧菌全套生化试验。

质量控制
1、外观
此干燥培养基的粉末均匀，具有良好的流动性，呈淡黄色。制备好的平板呈淡粉色至黄色固体培养基。
2、微生物试验
在36±1℃培养18-24h小时

质控菌株	菌株编号	生长情况	菌落颜色
副溶血性弧菌	ATCC 17802	+++	蓝绿色，菌落比较大
金黄色葡萄球菌	ATCC 25923	-	-
大肠杆菌	ATCC 25922	-	-
溶藻弧菌	ATCC 17749	+++	淡黄色或米黄色
非01群霍乱弧菌		+++	紫红色
创伤弧菌	ATCC 27562	+++	紫红色

方法的局限性
本培养基不能直接鉴定霍乱弧菌，副溶血性弧菌的特异性可达 95%，准确性非常高，有时可能需做其它补充试验。

典型特征
典型副溶血性弧菌显蓝绿色且菌落比较大，霍乱弧菌和创伤弧菌显紫红色，溶藻弧菌显淡黄色或米黄色

贮存
制备好的平板可保存 2-5 天，应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处， 保存温度 2-8℃，注意避光保存。

失效
干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。

注意
此培养基仅供实验室使用。