血涂片制备步骤与注意事项

血涂片的制备步骤:

（1）采血

静脉采血后，使用玻璃棒、毛细管、注射针头等在距载玻片一端1cm处加1滴抗凝血。

（2）推片

左手平执载玻片，或放在类似桌子等平坦地方，右手持推片从前方接近血滴，使血液沿推片边缘展开成适当的宽度，立即将推片与载玻片呈 30~45°角，轻压推片边缘将血液推制成厚薄适宜的血涂片，血涂片应呈舌状，头、体、尾清晰可见。

（3）干燥

将推好的血涂片在空气中晃动，使其迅速干燥。天气寒冷或潮湿时，应于37 ℃温箱中保温促干，以免细胞变形缩小。

（4）标记

在载玻片的一端用记号笔编号。

（5）染色

用特种玻璃铅笔在血膜两侧画两条线，防止染液外溢。再将瑞氏染液滴在血膜上，至染液淹没全部血膜，染1分钟。加等量蒸馏水（或缓冲液）与染液混合再染5分钟。最后用蒸馏水把染液冲掉，用吸水纸吸干，自然干燥后，即可观察。

血涂片制备注意事项:

1、要制备良好的血细胞涂片，玻片必须干净。使用玻片时，只能手持玻片边缘，切勿触及玻片表面，以保持玻片清洁、干燥、中性、无油腻。

2、最好使用非抗凝血制备血涂片，也可用EDTA抗凝血制备。使用抗凝血标本时，应充分混匀后再涂片。抗凝血标本应在采集后4h内制备血涂片，时间过长可引起中性粒细胞和单核细胞的形态学改变。

3、涂片的厚度、长度与血滴的大小、推片与载玻片之间的角度、推片时的速度等有关。一般认为血滴大、血粘度高、推片角度大、速度快则血膜厚，反之则血膜薄。

4、血膜应厚薄均匀适度，头尾及两侧有一定的空隙。如血膜面积太小，可观察的部分会受到局限，故应以在离开载玻片另一端2cm的地方结束涂抹为宜。一些体积特大的特殊细胞常在血膜的尾部出现。

5、血涂片必须充分干燥后方可固定染色，否则细胞尚未牢固地吸附在玻片上，在染色过程中容易脱落。