李氏菌增菌肉汤(LB1,LB2)基础使用说明书
2022-10-20 14:15 来源:上海远慕生物试剂
产品名称:李氏增菌肉汤基础(LB1,LB2)
英文名称:Listeria Enrichment Broth Base
供应商:远慕生物
用 途:李氏增菌肉汤基础(LB1,LB2)用于李斯特氏菌的选择性增菌培养(GB 4789.30-2010)。
贮 存: 李氏增菌肉汤基础(LB1,LB2)贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。
规 格:250g
原 理:
胰胨、多价胨和酵母膏粉提供氮源、维生素和生长因子;李斯特氏菌可耐受较高含量的氯化钠,同时对肠球菌起抑制作用;磷酸二氢钾和磷酸氢二钠为缓冲剂;七叶苷为可发酵的糖类;萘啶酮酸和吖啶黄为选择性抑菌剂。
配方(每升):
胰胨 5g
多价胨 5g
酵母膏粉 5g
氯化钠 20g
磷酸二氢钾 1.35g
磷酸氢二钠 12g
七叶苷 1g
最终pH7.3±0.2
使用方法:
1、称取 李氏增菌肉汤基础(LB1,LB2)49.4g,加入1000 mL蒸馏水或去离子水,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121℃灭菌15分钟。
2、每225ml基础加入LB1配套试剂1支(SR0100)(盐酸吖啶黄素2.7mg和萘啶酮酸4.5mg),每200ml基础加入LB2配套试剂1支(SR0110)(盐酸吖啶黄素5.0mg和萘啶酮酸4.0mg)。
3、无菌采取检样25g(mL)放灭菌均质器中加225 mL LB1增菌液中,充分搅拌成均质。如不能及时检验,可暂存4℃冰箱。
4、LB1增菌液225 mL放30±1℃培养24小时后,取出0.1 mL加入10 mLLB2增菌液中二次增菌。于30±1℃培养24小时,做进一步的分离试验。
质量控制:
质控菌株接种LB1、LB2后于30±1℃培养24小时,结果如下:
菌 名 菌 号 生长状况
单核细胞增生李斯特氏菌 CMCC(B)54002 良好
大肠埃希氏菌 ATCC25922 受抑制
粪链球菌 CMCC(B)32223 受抑制