细胞免疫荧光的详细操作步骤

细胞免疫荧光的详细操作步骤

1，取出细胞爬片放到35mm或60mm用过的细胞培养皿里，PBS洗三遍。注意有的时候作的细胞爬片可能比较小，因此夹取的时候要小心。

2，4%多聚甲醛固定20分钟，PBS洗三遍。

3，0.2%Triton X 100通透10分钟，PBS洗三遍。

4， 与二抗相同宿主的血清封闭30分钟，PBS洗三遍。

5.，一抗4度湿盒内过夜，也可37度2小时，感觉前者效果好，PBS洗三遍。

6，二抗室温2小时，或者37度1半小时，PBS洗三遍。

7，最好用DAPI染核，然后直接照荧光片。

8，蒸馏水洗掉PBS，甘油封片，指甲油封片子的四周。