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产品名称:

T4DNA连接酶

 
产品编号: YM-A2333G 
英文名: Synthetase,polydeoxyribonucleotide (adenosine triphosphate) 
CAS号: 9015-85-4
T4DNA连接酶

英文名称:T4 DNA Ligase

CAS号:9015-85-4

级别:BR

来源本T4 DNA Ligase由大肠杆菌表达,表达基因的来源为T4嗜菌体。

活性定义One unit is defined as the amount of enzyme required to give 50% ligation of HindIII fragments of lambda DNA in 30 min at 16℃ in 20 μl of the assay mixture containing 50 mM Tris, pH 7.5, 10 mM MgCl2, 10 mM DTT, 1 mM ATP, 25 μg/ml BSA and a 5'-DNA termini concentration of 0.12 μM (300 μg/ml)。

酶储存溶液:20 mM Tris, pH 7.5, 50 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA and 50% (v/v) glycerol。

10X Ligation Buffer400 mM Tris, pH 7.8, 100 mM MgCl2, 100 mM DTT, 5 mM ATP。

失活或抑制:65℃孵育10分钟可以导致T4 DNA Ligase失活;NaCl或KCl浓度大于200mM时强烈抑制T4 DNA Ligase。

性状:液体。该酶催化双链DNA或RNA中毗邻的5'磷酸基团和3'-羟基末端之间形成磷酸二酯键,还可以修复双链DNA、RNA或DNA/RNA复合体中的单链切口,连接DNA的粘性和平末端,但该酶对单链核酸无酶活性。该酶需要辅因子ATP

用途:生化研究。粘性末端或平末端双链DNA的连接;双链寡核苷酸接头与双链DNA连接;双链DNA、RNA或DNA-RNA复合体中缺口的修复;连接酶介导的RNA检测;位点特异性突变;扩增片段长度多态性

保存: -20°C

 

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