精子细胞BWW培养基储存液

精子细胞BWW培养基储存液的灭菌方法，产品用途，特点，说明书，操作步骤，注意事项，规格等咨讯由上海远慕生物提供介绍，本司专业供应不同系列的培养基，抗体，动物血清血浆，标准品对照品，抗原，细胞培养，蛋白质，化学试剂，生化试剂，维生素，氨基酸，生物分子，微生物，实验耗材，染色液，缓冲液，溶液，其他实验试剂等，品种齐全，为满足于客户的需求，我们的产品推出了进口系列及国产系列，欢迎来电洽谈！

中文名：精子细胞BWW培养基储存液
供应商：上海远慕
规格：500ml
分类：培养基
保存：4℃,12个月
系列：精子细胞BWW培养基
说明：无菌溶液。经过滤除菌处理。
组成：由氯化钠、氯化钾、氯化钙、硫酸镁、酚红等组成，不含葡萄糖、丙酮酸钠、BSA等以及抗生素。
用途：本品是一种旨在用于广谱动物和人体精子细胞获能处理的常用营养液。

精子细胞BWW培养基储存液操作步骤及注意事项： 
A、操作步骤：
1、 取干净的精液样本室温放置，使之充分液化。
2、 制备精子细胞(仅供参考，不是必须步骤)：
a、上泳法：取一个无菌的15ml锥底离心管，加入1ml液化的精液，在其上方轻轻加入Earle培养液，45°倾斜试管。轻轻竖立试管，取出最上层的1ml液体。加入8ml增补的Earle培养液稀释，弃上清。加入Earle培养液0.5ml重新悬浮细胞，用于精子密度或功能的评估。
b、非连续密度梯度法：取一个无菌的锥底离心管，加入Percoll。轻轻加入3ml 40%的Percoll于Percoll液面上，小心操作，不要打乱两种液体的界面。轻轻加入1-2ml精液于梯度溶液上，弃上清。将管底的精子团重新悬浮于的Earle培养液中，离心，弃上清。加入1mlEarle培养液，重新悬浮。
3、 将含有精子细胞的离心管置于37℃含5%CO2、95%空气的细胞培养箱中孵育。如无上 述培养箱，可将离心管密封加盖，置于37℃的普通培养箱内孵育。在孵育过程中，大多数活动的精子从精浆中游离到覆盖上面的培养液内。
4、 离心精子悬液，使精子细胞密度接近于10×106/ml，将精子重悬于精子细胞BWW培 养基中，并在37℃含5%CO2、95%空气的细胞培养箱内孵育。如无上述培养箱，可将离心管密封加盖，置于37℃的普通培养箱内孵育。在孵育过程中，将试管20°倾斜。

B、注意事项：
1、 注意无菌操作，尽量避免污染。
2、 如无Earle培养液和增补的Earle培养液，可用精子细胞BWW培养基代替。
3、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
4、操作过程中，请遵循说明书操作。

精子细胞BWW培养基储存液灭菌方法及保存方法：
A、灭菌方法：
1、高压蒸汽灭菌：
a、高压蒸汽灭菌适合于耐高温培养基、接种器械和蒸馏水的灭菌。培养基在爱制备过程中混入各种杂菌，分装后应立即灭菌，至少应在24h内完成灭菌工作。
b、灭菌时一般是在0.105MPa压力下，温度121℃时，灭菌15~30min即可。消毒时间不宜过长，也不能超过规定的压力范围，否则有机物质特别是维生素类物质就会在高温下分解，失去营养作用，也会使培养基变质、变色，甚至难以凝固。
c、将蒸馏水或自来水装在三角瓶中，装水量一般不超过瓶的2/3，用牛皮纸或硫酸纸包扎封口，然后放入高压锅中灭菌后即为无菌水。
d、灭菌后的培养基可放到培养室中预培养3d，若无污染现象，则证明灭菌是彻底的，可以使用。暂时不用的培养基最好置于10℃下保存。
e、含IAA或GA3的培养基应在1周内用完，其他培养基最多也不要超过1个月。
2、过滤灭菌：
a、一些植物生长调节剂及有机物，如IAA、GA3、ZT、CM等，遇热容易分解，不能与培养基一起进行高温灭菌，而要使用细菌过滤器滤去其中的杂菌。
b、细菌过滤器与滤膜（孔径0.45微米）使用之前要先进行高压灭菌。过滤后的溶液要立即加入培养基中，若为液体培养基，可在培养基冷却至30℃时加入；若为固体培养基，必须在培养基凝固之前（50-60℃）加入，振荡使溶液与其他成分混合均匀。