中文名:称肌球蛋白重链抗体
英文名:Fast Myosin Skeletal Heavy chain
供应商:上海远慕
货号:5885R
抗体来源:Rabbit
克隆类型:Polyclonal
交叉反应:Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig,
分子量:223kDa
细胞定位:细胞浆
性状:Lyophilized or Liquid
浓度:1mg/ml
亚型:IgG
纯化方法:affinity purified by Protein A
储存液:0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol
免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human Myosin heavy chain 1:901-1000/1939
产品应用:ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:400-800 IHC-F=1:400-800 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复) not yet tested in other applications,optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user。
保存条件:Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles, The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C,When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C。
称肌球蛋白重链抗体参数说明
称肌球蛋白重链抗体保存方法:
抗体保存得当与否直接决定了抗体的活性和使用效果;如果抗体保存得当,大部分抗体活性都可以维持数月甚至数年;请按照说明书或者抗体标签上推荐的保存条件正确保存抗体!无论是保存还是运输,绝对避免反复冻融抗体!
1、拿到抗体后请务必在1000-3000转离心1-2分钟后再打开管盖进行分装和保存!(由于运输过程中反复颠簸,管内微量抗体容易聚集在管盖处,一旦直接打开容易流失抗体。请放心抗体出厂时保证已装入足量。)
2、对于大部分抗体,比较合适的保存方式是分装后保存在-20℃冰箱;分装可以最大程度降低反复冻融对抗体活性的损害,同时也降低了多次从同一管中吸取抗体造成污染的可能性;分装的量以一次实验用完为好,但建议最少不要少于10μL每份;分装体积越小,抗体浓度可能会受到蒸发以及管壁吸附的影响,同时分装次数越多移液吸头吸附的抗体也越多,可能会误认为抗体没有足量装入;(最好用无菌的进口0.2ML离心管来分装抗体,国产的小管一般没有经过很好的硅化处理,容易吸附抗体蛋白,影响抗体活性。)分装时请将无菌的微量移液器吸头先插入管底部反复吹打几次后再吸出抗体,以便抗体有效成分与抗体保护剂充分混匀;复融后的分装抗体如果一次用不完,请将剩余母液保存在4℃冰箱,避免再冻起来!绝对避免将抗体保存在自动除霜冰箱的冷藏室中。尽量将抗体保存在手动除霜冰箱里面,而不是在冰箱门上。
3、大部分抗体收到后4℃短暂保存1-2周对抗体活性是基本没有影响的;如果抗体很快(1-2周内)就能使用完,推荐在4℃保存,避免反复冻融对抗体活性的损害;如果要长期保存则分装后-20℃保存。
4、特殊抗体的保存:酶偶联抗体不应冻存,而应保存于4℃;冻融不仅影响抗体结合能力,还会降低酶活性;无论偶联至荧光染料,酶还是生物素,偶联抗体都应保存于深色试剂瓶中或用金属箔包裹;暴露于光线中将损害偶联物的活性;特别是荧光偶联物易受到光漂白影响,在实验的所有阶段都应避光。
称肌球蛋白重链抗体鉴定方法:
1、抗体的效价鉴定:不管是用于诊断还是用于治疗,制备抗体的目的都是要求较高效价;不同的抗原制备的抗体,要求的效价不一;鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应,琼脂扩散试验,酶联免疫吸附试验等;常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较;如制备抗抗体的效价,一般就采用琼脂扩散 试验来鉴定。
2、抗体的特异性鉴定:抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力;抗体的特异性高,它的识别能力就强;衡量特异性通常以交叉反应率来表示;交叉反应率可用竞争抑制试验测定;以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在ic50时的浓度,并按公式计算交叉反应率。
3、亲和力:是指抗体和抗原结合的牢固程度;亲和力的高低是由抗原分子的大小,抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的;有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键,疏水键,侧链相反电荷基因的库仑力,范德华力和空间斥力;亲和力常以亲和常数k表示,k的单位是l/mol;抗体亲和力的测定对抗体的筛选,确定抗体的用途,验证抗体的均一性等均有重要意义。
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