【葡萄糖-6-磷酸酶染色液(铅法)使用说明
【信息说明】
产品名称:葡萄糖-6-磷酸酶染色液(铅法)
供应商:远慕生化试剂厂家
规格:3×50ml
分类:酶类染色
储存条件:4℃,避光,6个月
用途:葡萄糖-6-磷酸酶
注意事项:主要由孵育液、硝酸钴、硫化铵、等组成。酶活性部位呈棕色沉淀。
【操作步骤】
1、冰冻切片入蒸馏水清洗。
2、入G-6-Pase孵育液37℃孵育。
3、自来水冲洗后,蒸馏水冲洗。
4、在上述过程中配制ALP硫化工作液,即取试剂(B)用蒸馏水稀释50倍, 即为ALP硫化工作液,即配即用。切片入硫化工作液孵育。
5、自来水水洗。
6、(可选)入中性福尔马林固定。
7、入蒸馏水水洗2次。
8、甘油明胶封片。
9、染色结果:G-6-Pase活性处为棕色沉淀
【注意事项】
1、ALP硫化液易失效,最好分成小分储存,一经开启立即使用。
2、ALP硫化液具有腐蚀性和刺激性气味,应小心操作。
3、对冰冻切片染色时,应减少切片在室温暴露的时间。
4、葡萄糖-6-磷酸酶染色液(铅法)适用于冰冻切片,一般不固定,也可染色后固定,固定步骤非必须步骤。
【简介说明】
葡萄糖-6-磷酸酶(glucose-6 –phosphatase,G-6-Pase)是一种多存在于哺乳类动物肝、肾、肠等组织的膜结合酶,G-6-Pase和微体紧密结合,定位于内质网,是内质网的主要标志酶,能把葡萄糖-6-磷酸水解成葡萄糖和磷酸。葡萄糖-6-磷酸酶染色液(铅法)采用重金属捕捉剂和磷酸结合显示酶的活性。该酶对固定很敏感,组织经80%乙酸溶液固定后用石蜡包埋,G-6-Pase完全被抑制。
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