产品名称:EDTA细胞消化液(0.04%)
规格:100ml/500ml
供应商:上海远慕生物
分类:细胞培养
储存条件:室温,12个月
用途:细胞消化液的一种,含有pbs和edta,不含胰蛋白酶,对细胞损伤较小。
注意事项:无菌溶液。
在组织细胞的体外培养和传代细胞培养以及原代细胞培养中的组织细胞分散(将组织块制备成单个细胞悬液)中,贴壁生长细胞的消化分散均要使用组织细胞消化液。常用的消化液为胰蛋白酶,EDTA(乙二胺四乙酸二钠)等,其功能主要是通过鏊合钙离子等,改变细胞间的连接,使组织或细胞分散成单个细胞,制成细胞悬液用于进一步的实验。
EDTA细胞消化液(EDTA Solution)采用进口EDTA为主要原料,溶于无钙镁平衡盐溶液中,经灭菌处理,可以直接用于培养细胞的消化、传代,或某些组织的消化。本产品具有使用方便、质量稳定、消化快速、安全无毒、细胞状态好等特点,可单独使用,也可与胰蛋白酶细胞消化液联合使用,通常室温消化2-5分钟左右就可以消化下大多数贴壁细胞。EDTA细胞消化液分为含酚红和不含酚红2类产品,采购时请务必注明。
使用说明:临用前,取出置37℃水浴或室温中预热,取适量加入细胞瓶中,置37℃消化2~5min。
贴壁细胞的消化:贴壁细胞在培养瓶中长成致密单层后,继续生长的空间不足,培养基中的营养成份也消耗较多,同时代谢废物也有较多堆积,需要分瓶培养,扩增、传代。对于悬浮生长细胞和贴壁不太紧的细胞如SP2/0,293等,可直接吹散后分瓶;而对于贴壁较紧的细胞如Hela,HepG2,CHO等,则需要以细胞消化液消化后,才能脱落和分散,扩瓶。一般操作过程为(以下操作均必须严格按无菌操作的要求进行):
·将长成致密单层细胞的细胞瓶中原来的培养液弃去;
·加入0.25%胰酶溶液,视细胞瓶的大小加入体积为0.5ml或更多(依培养器皿的大小而定),以使充分浸润;
·一般消化时间约为1至3分钟,肉眼观察瓶底由半透明(细胞单层连接成片)转为点状透明(出现细小空隙)时,弃去细胞消化液,并加入适量的完全培养液终止消化,吹打分散;
·视实验目的分入多瓶继续培养,一般比例为一传二到一传四;或接种与微孔板中。
组织的消化:
不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织并成单个细胞悬液为宜,EDTA单独用于组织细胞的消化效果多不理想,通常要与其他消化液联合使用。
注意事项
1.避免接触眼睛、呼吸系统、皮肤;若误接触眼睛,立即用水冲洗或向医生咨询;
2.由于组织或细胞性质不同,实验人员应依据具体情况,确定**消化时间;消化细胞时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁和生长状况;
3.本产品不含抑菌剂,在使用过程中要特别注意无菌操作,避免消化液被微生物污染,大包装,建议无菌分装保存;
4.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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改良Hoagland's(霍格兰氏)营养液-大量元素(100×) (可配50升)
Hoagland's(霍格兰氏)营养液-大量元素(100×) (可配5升)
Hoagland's(霍格兰氏)营养液-大量元素(100×) (可配10升)
Hoagland's(霍格兰氏)营养液-大量元素(100×) (可配50升)
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